مواد و ابزار مورد نیاز
1. اتانول 70 الی 100 % به
میزان 10 تا 15 میلی لیتر،
2. نمک خوراکی خیلی کم (نصف
قاشق چایخوری)،
3. مایع ظرفشویی رنگی یا صابون مایع 5 تا 8 قطره،
4. بشر یا لیوان شیشهای، یا یکبار مصرف شفاف،
5. همزن شیشهای یا سیخ چوبی،
6. حداقل 5 میلی لیتر بزاق.
در سلولهای جانوری که صرفاً غشای سلولی دارند،
باید غشا حذف شود؛ اما در مورد سلولهای گیاهان، باکتریها و قارچها لازم است که با روشهای فیزیکی دیواره سلولی هم از بین برده
شود، مثلاً، در مورد سلول گیاهی بافت مورد نظر را میتوان در هاون کوبید و به این ترتیب
دیوارههای سلولی شکسته میشوند.
روش انجام کار
در ابتدا، بعد از شستن دهان، به طوری که دهان فاقد ذرات غذایی لابهلای دندانها باشد، سعی در جمعآوری بزاق در مدت زمان 1 دقیقه میکنیم و حتی با آب دهان محکم
به سقف بخشهای دیگر دهان ضربه میزنیم تا سلولها از بافت پوششی جدا و وارد بزاق شوند.
سپس بزاق را در درون بشر یا لیوان شیشهای
یا یکبار مصرف شفاف میریزیم. هر قدر حجم بزاق بیشتر باشد،
نتیجه مطلوبتری حاصل میشود. بنابراین، میتوان چند بار عمل جمعآوری بزاق را انجام داد.
سپس چند قطره مایع ظرفشویی رنگی
روی بزاق میریزیم و با حالت دورانی بدون
همزن شیشهای هم میزنیم، در حدی که بزاق و مایع با هم
مخلوط شوند. بعد، کمی نمک طعام به این مواد میافزاییم و آن را هم مخلوط میکنیم و در آخر به میزان تقریباً 2 برابر
مایع موجود در بشر، اتانول 70 الی 100
درصد با دمای اتاق، یا هر نوع الکل بیرنگ دیگر را به مواد میافزاییم و با حرکت دورانی کار را ادامه
میدهیم. با پیدایش رشتههای DNA با کمک همزن شیشهای یا حتی سیخ چوبی باریک و تمیز رشتهها را بهصورت دورانی دور هم جمع میکنیم که به راحتی قابل مشاهده باشند.
توضیح
از مایع ظرفشویی برای از بین
بردن لیپیدهای غشای سلولهای پوششی استفاده میکنیم. مایع ظرفشویی با پایین آوردن کشش سطحی، غشای
سلول و هسته را پاره میکند.
علت تأکید بر رنگی بودن مایع
ظرفشویی یا صابون مایع، ایجاد تباین هرچه بیشتر بین محیط مایع و رسوب DNA است
که بهصورت مخاط سفید رنگی تشکیل میشود.
برای از بین بردن پروتئینهای سلول و هیستونهای متصل به DNA با اضافه کردن نمک آشپزخانه رسوب تشکیل میشود.
برای سرعت بخشیدن و رسوب دادن DNA از اتانول استفاده میشود؛ چون وقتی اتانول به محلول اضافه میشود، قدرت یونی حلال کم میشود و تمایل نوکلئیک اسید هم به حلال
کاهش مییابد و با یونهای موجود در محیط (Na، ...) واکنش میدهد، سنگین میشود و رسوب میکند؛ زیرا DNA در الکل نامحلول، اما در آب محلول است به هم میچسبند و در این مرحله همچنین نمک خارج
می شود.